《植物生理学报》 2008, 44(4): 715-718

刺五加体细胞胚cDNA 文库的构建

刘立琨, 李成浩*, 李俊秀, 阎秀峰

东北林业大学生命科学学院, 林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室, 哈尔滨150040

通信作者：李成浩；E-mail: chli0@163.com；Tel: 0451-82190607

摘　要：

以2,4-D 处理的刺五加体细胞胚为实验材料, 提取总RNA并分离mRNA合成cDNA, 连接到pAP3neo Predigested 载体上。采用电穿孔法将重组质粒转化到DH10B中。经测定, 原始文库滴度为2.3×106 pfu·mL-1, 重组率大于95%。插入片段的长度大部分在0.5~2.0 kb之间, 平均长度为0.96 kb, 表明刺五加体细胞胚cDNA文库已构建成功。

关键词：刺五加; 体细胞胚发生; cDNA文库

收稿：2008-05-05   修定：2008-06-26

资助：国家自然科学基金(30671701)。

刺五加体细胞胚cDNA 文库的构建

刘立琨, 李成浩*, 李俊秀, 阎秀峰

东北林业大学生命科学学院, 林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室, 哈尔滨150040

Corresponding author: ; E-mail: chli0@163.com; Tel: 0451-82190607

Abstract:

以2,4-D 处理的刺五加体细胞胚为实验材料, 提取总RNA并分离mRNA合成cDNA, 连接到pAP3neo Predigested 载体上。采用电穿孔法将重组质粒转化到DH10B中。经测定, 原始文库滴度为2.3×106 pfu·mL-1, 重组率大于95%。插入片段的长度大部分在0.5~2.0 kb之间, 平均长度为0.96 kb, 表明刺五加体细胞胚cDNA文库已构建成功。

Key words: 刺五加; 体细胞胚发生; cDNA文库